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[BA202400447]人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响(测试加工服务)备案公示公告

基本信息
项目名称 省份
业主单位 业主类型
总投资 建设年限
建设地点
审批机关 审批事项
审批代码 批准文号
审批时间 审批结果
建设内容
[BA202400447]人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响(测试加工服务)备案公示公告
发布时间:2024-04-29 15:46:00
采购信息
项目编号 BA202400447 项目名称 人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响(测试加工服务)
经办人单位 第一医院(白求恩第一临床医学院) 经办人 吴荻
预算金额 登录即可免费查看.00
人民币
成交金额 登录即可免费查看.00 人民币
成交供应商 宝瑞金(吉林)生物科技有限公司
质保期 24

联系地址 吉林省-长春市-高新技术产业区宇光街399号 采购单位 吉林大学第一医院(白求恩第一临床医学院)
付款方式 服务完毕验收合格后100%付款。
供应商联系手机 18043180234 服务时间 2024年05月09日 至 2024年05月11日
服务地址 吉林省-长春市-高新技术产业区宇光街399号
验收方式 以成交单为准,参考相关内容进行验收。验收程序以甲方职能部门规定为准。
售后服务要求
(一)乙方不能按承诺提供服务或所提供的服务不符合成交单规定标准,甲方有权拒收。同时,乙方向甲方
支付成交单款总额5%的违约金。
(二)乙方逾期交付服务成果时,每逾1日乙方向甲方偿付成交单款总额3‰的滞纳金。逾期超过30天后,甲
方有权决定是否继续履行成交单。

明细清单
采购品目 其他医学研究与试验发展服务 名称 测试加工费
单位 数量 1
单价 ¥123,000.00
总价 ¥123,000.00
范围/服务内容及要求 附件一 服务范围/内容及要求
实验一
(一)研究内容
观察人参益元颗粒对 Lewis 荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响。
成人每日 14g(小鼠:12.33*14g/60kg=2.88g/kg)
(二)研究方法
1. 实验材料
1.1 实验细胞
实验细胞采用小鼠 Lewis 肺癌细胞细胞株。细胞株使用含 10%胎牛血清和 1%
青链霉素的高糖 DMEM 培养基,在 5%CO2、37℃条件下培养,稳定传代至 4-5 代
备用。
1.2 实验动物
实验动物购自于北京维通利华实验动物技术有限公司,采用 8 周龄 C57BL/6J
雌性小鼠,55 只,体重 18-20g。
2 实验方法
2.1 皮下接种
用 PBS 将 Lewis 细胞制备成细胞悬液,根据预实验调整细胞悬液浓度至指定
浓度(在 5×10
6 /mL 上下选择,需要根据预实验结果判定该批细胞株增殖活性)。
在超净台上操作,用 75%酒精消毒 C57BL/6 小鼠右腋窝部皮肤,准备细胞接
种注射前使用移液枪将预先配制好的细胞悬液充分吹散,用注射器吸取 Lewis
肺癌细胞细胞悬液 0.2mL,针头轻轻刺入皮下,推入肿瘤细胞悬液。
2.2 人参益元药液配制
本研究使用的人参益元颗粒由吉林省中医药科学院制剂室提供,药物组成:
黄人参、黄芪、佛手、白芍、鸡血藤、甘草,规格:每袋装 10g,一次 1 袋,一
日 1 次。称量 2.88g,蒸馏水定容至 10mL。
2.3 动物分组及干预
随机选取 10 只小鼠作为空白对照组,其余小鼠接种 Lewis 细胞,接种后 1
周,检查小鼠成瘤情况,用手指轻轻触摸小鼠右侧腋下皮肤,若接种成功则可触
及约黄豆粒大小的结节。选取造模成功的荷瘤小鼠 40 只,按体质量随机分为 4
组(每组 10 只):中药组、顺铂组、中药联合顺铂组(中西药组)和模型组。从接
种后第 8 天开始,给予荷瘤小鼠相应药物干预:
①对照组:按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水,连续灌胃 21 天,并从第 1 天开始
隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml;
②模型组:按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水,连续灌胃 21 天,并从第 1 天开始
隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml;
③顺铂组:从第 1 天开始,隔天腹腔注射顺铂注射液 0.4ml(浓度 2mg/kg),
共注射 10 次,同时按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水 21 天;
④中药组:从第 1 天开始每日灌胃人参益元颗粒 10mL/kg,连续灌胃 21 天,
并隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml,共注射 10 次;
⑤中西药组:按照人参益元颗粒 10mL/kg 每日连续灌胃 21 天,同时隔天腹
腔注射顺铂注射液 0.4ml,共 10 次。
3. 观测指标
3.1 一般观察和体重
每天检查小鼠的体重和一般情况,包括行为、皮毛状态、食物摄入量和排便
情况。
3.2 瘤体体积测量
分别于干预周期的第 1、4、7、10、14、20 天,用电子游标卡尺测量各组小
鼠皮下肿瘤的长径和短径,根据长径(a)和短径(b)来计算肿瘤体积,计算公式为:
V(cm3)=ab²/2,以干预天数为横轴,小鼠肿瘤体积为纵轴,绘制各组小鼠的肿瘤
生长曲线。(每组 10 只)
3.3 肿瘤组织 HE 染色
将各组小鼠皮下移植瘤剥离后制成组织切片,采用HE 染色方法对肿瘤组织
进行染色,以观察其组织细胞形态。(每组三只,切片做全扫描)
3.4 计算抑瘤率
各组进行干预 21 天后脱颈椎处死小鼠,完整剥取小鼠右侧腋部肿瘤组织,
滤纸吸干瘤体表面后立即采用精密电子天平称取肿瘤质量,并进行瘤体拍照。根
据肿瘤质量计算各组抑瘤率,抑瘤率=(模型组平均瘤质量一药物干预组平均瘤质
量)/模型组平均瘤质量×100%。(每组 10 只)
3.5 外周血和淋巴细胞(PBMC)的测定
给药 21 天后,取小鼠眼窝静脉血样。用全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、
血小板(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。(每组 5 只)
3.6 免疫器官指数
处死小鼠前先进行眼球采血,眼球采血后处死小鼠,尽量完整摘取胸腺及脾
脏,冲洗并用滤纸吸干水分后称重。胸腺及脾脏指数计算公式:胸腺指数=(胸腺
重量(mg)×1000)/小鼠体重(g),脾脏指数=(脾脏重量(mg)×1000)/小鼠体重(g)。
(每组 10 只)
3.7 免疫相关指标检测
流式细胞仪检测脾脏中 CD4+、CD8+以及 CD4/CD8 水平;(每组 3 只)
ELISA 法检测外周血和脾脏中相肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ
(IFN-γ) 含量。(每组 5 只)
费用:
测试加工费:75000
实验二
1、人参益元颗粒在小鼠体内对放化疗所致的免疫功能低下的拮抗作用
雄性 SD 大鼠 40 只,随机分为正常对照组、模型对照组及人参益元颗粒低、
中、高剂量干预组共 5 组,每组 8 只,称重并标记。
(1)免疫低下模型建立:实验第 1d 至第 7d,模型组及各治疗组采用腹腔注射
20mg/mL 的 CTX 注射液,按 40mg/kg,首次加倍,隔天 1 次,连续 4 次的造模方
法,正常对照组用等体积的生理盐水代替。
(2)动物给药:第 1d 至第 21d,药物治疗组在免疫抑制同时分别给予不同剂量
人参益元药液灌服,高剂量组 2.88g/kg,中剂量组 1.44 g/kg ,低剂量组 0.72
g/kg ,灌胃体积均为 10 mL/kg ,灌胃 1 次/日,正常对照组和模型组大鼠每天
予等量蒸馏水灌胃。
(3)检测指标。
①流式细胞术检测外周血中 CD3+、CD4+;(每组 8 只)
②ELISA 法检测外周血相关免疫细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素- γ(IFN-γ) 含量;(每组 8 只)
③Western blot 检测脾组织 TNF-α蛋白的表达;(每组 3 只)
④外周血淋巴细胞(PBMC)的测定全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、血小板
(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。(每组 8 只)
费用:
测试加工费:48000
实验结果以报告形式提供,提供所试剂仪器等信息,数据形成表
格以及 PRISM 软件绘制的柱状图,病理图等,可提供分析软件的文件,
用以后期自由调整结题材料和论文的图信息

信息咨询
吉林大学招标与备案(采购)管理中心
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